三代全长 16S 测序分析主要是对 16S 全长进行扩增,基于PacBio 测序平台测序,然后结合生物信息学分析,对微生物多样性及群落组成差异进行研究。相比较二代测序只选择 1-2 个高变区进行测序,三代可以获得全长的 16S 序列,更多变异区信息可以提高物种鉴定的分辨率,还可以提高对于群落组成的鉴定的精度,更加真实的还原样本中微生物群落结构。
基于三代Pacbio Sequel测序,直接测通16S rRNA的全长序列,物种分类可精确到“种”
建库阶段无PCR过程,因此测序过程无GC偏好性,数据结果更加准确
CCS序列自我校正,测序错误率大幅下降,数据一致性好,碱基准确度可达99.99%
DNA提取与质检
全长扩增
产物纯化
混样建库
Pacbio测序
Pacbio sequel
5000 CCS
60个工作日